头花蓼Polygonum capitatum Buch-Ham. exD. Don和尼泊尔蓼P. nepalense Meisn.均为蓼科蓼属头状蓼组植物( Sect. CephalophilonMeisn. ),其药用具有地区性,在我国西南地区多用于治疗风湿痹痛等疾病其中,头花蓼自20世纪90年代以来,作为贵州特色苗药的代表,既是多个治疗泌尿道感染的中成药制剂原料,也建立了GAP的规范化种植基地,开展了种质资源评价与优良种源筛选工作。但就目前而言,头花蓼的栽培资源尚难以满足产品对原料的需求,野生资源仍是其药材主要来源,由于头花蓼以全草类入药,药材干燥皱缩,极易破碎,在头花蓼药材的市场收购中,出现了同属近缘种如尼泊尔蓼植物掺混现象,造成头花蓼药材使用混淆从头花蓼尼泊尔蓼的本草临床使用来看,二者虽多用于治疗风湿痹痛等疾病,但在功能与主治上有不同侧重点,头花蓼功效上偏重于利尿通淋,主要治疗泌尿道感染肾盂肾炎;尼泊尔蓼则偏重于治疗风湿痹痛之症,主要用于咽喉肿痛赤白痢疾风湿痹痛等症。因此,准确鉴定头花蓼药材,避免采收生产上的伪品掺杂是确保头花蓼临床疗效可靠的关键。本文在RAPD分析工作的基础上,采用SCAR标记技术建立快速准确的头花蓼DNA分子标记方法,为准确鉴定头花蓼与近缘种尼泊尔蓼的破碎药材粉末药材提供一种新方法
周涛1*,谢宇2,张丽艳1,魏升华1,金艳蕾1
1.贵阳中医学院,贵州贵阳 550002
2.贵州威门药业股份有限公司,贵州贵阳 550018
摘要:目的:建立快速准确的头花蓼与尼泊尔蓼药材的分子标记鉴定方法。方法:通过RAPD随机引物筛选,获得头花蓼特异的RAPD分子标记片段,经克隆、测序,重新设计特异性引物转化形成稳定的SCAR标记。结果:获得2条稳定扩增的头花蓼特异片段Z300,Z1100,根据该2特异片段序列设计4对特异引物,分别对头花蓼与尼泊尔蓼药材DNA进行扩增,其中引物Z1-2可从头花蓼药材中扩增获得约300bp的片段,而尼泊尔蓼药材则未扩增出该片段。结论:引物Z1-2成功将Z300片段转化为SCAR分子标记,可作为头花蓼与近缘种尼泊尔蓼药材分子鉴定的依据。
文章下载:附件