自体吞噬(autophagy；简称自噬)是由溶酶体介导的降解胞质内受损的细胞器或蛋白质的代谢过程[1]。动脉粥样硬化(atherosclerosis，AS)是动脉管壁内膜的一种慢性炎症性疾病，血管壁产生粥样斑块为其特征。近年研究发现细胞自噬与AS紧密相关，自噬参与并调控着AS的发生、发展进程[2，3]。研究表明适度的细胞自噬通过降解细胞内受损的结构起到抑制AS的形成和发展的作用[4]。
黄连解毒汤载于《外台秘要》，是传统的清热解毒方剂，由黄连、黄芩、黄柏、栀子组成，具有泻火解毒的功效。临床实践和实验研究方面的数据表明,黄连解毒汤能通过多途径、多环节、多靶点整合起效干预和防治AS及稳定斑块的作用,相关的作用机制与其抗炎、降脂、保护血管内皮细胞、改善血液流变学、抑制血管平滑肌细胞增殖、调节巨噬细胞分化、调节纤溶系统、抗氧化应激等作用有关[5-9]，但其作用机制尚未完全明了。我们猜想黄连解毒汤具有的抗AS活性机制是否与调控AS相关的细胞自噬有关？作为清热解毒传统方剂，黄连解毒汤能否诱导巨噬细胞发生自噬，以及能否通过自噬表现出抗AS效应，国内外尚未见相关文献报道。本研究采用血清药理学方法观察黄连解毒汤对RAW264.7巨噬细胞自噬相关基因及其蛋白的影响，并初步探讨其部分调控机制，为临床应用黄连解毒汤治疗AS积累实验依据。
于红红1,吴玛莉2,张智伟3,陈瑞1,吴云1,段智璇1,田维毅1
1 贵阳中医学院,贵阳550002
2 贵州省疾病控制中心，贵阳550002
3 北京市丰台中西医结合医院，北京100072
[摘要] 目的：考察黄连解毒汤含药血清对RAW264.7巨噬细胞自噬的影响，初步探讨其抗动脉粥样硬化的作用机制。方法：采用大、中、小剂量黄连解毒汤水煎剂灌胃干预SD大鼠，制备含药血清；经MTT法观察含药血清对细胞增殖的影响后，选择各剂量浓度为20%的含药血清干预体外培养的巨噬细胞，采用荧光定量PCR方法检测自噬相关基因Beclin1和mTOR的mRNA表达水平；Western blot检测Beclin1、p-mTOR蛋白的表达变化。结果：与正常对照组血清相比，黄连解毒汤含药血清干预后诱导了Beclin1 mRNA及蛋白的表达，抑制了mTOR mRNA及p-mTOR蛋白的表达。结论：黄连解毒汤含药血清可诱导RAW264.7巨噬细胞自噬相关基因Beclin1的表达、抑制mTOR的表达，这可能是该方抗动脉粥样硬化作用的重要机制之一。
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