四妙勇安汤载于《验方新编》，是传统的清热解毒方剂，由金银花、玄参、当归、甘草组成，具有清热解毒、活血通脉之功。现代药理研究已证实四妙勇安汤具有抗炎、抗动脉粥样硬化、保护血管、改善血液流变学、抗凝及抑制血栓形成等作用[1-2]。动脉粥样硬化(atherosclerosis，AS)是血管壁产生粥样斑块为其特征的一种慢性炎症性疾病，发病率高且严重危害健康。研究表明，在AS发生和发展过程中TLR4信号转导通路和各种炎症因子发挥着重要的作用［3-4］。本实验旨在观察四妙勇安汤含药血清能否抑制LPS诱导的巨噬细胞炎症反应以及这种抗炎效应是否涉及TLR4/MyD88信号通路，以寻求四妙勇安汤抗炎作用的细胞学机制，为其临床上用于AS等慢性炎症性疾病的治疗积累实验依据。
于红红1,吴玛莉2,张智伟3,陈瑞4,吴云4,段智璇4,岳文鹏4,田维毅4*
1贵阳中医学院实验中心，贵阳550002
2贵州省疾病预防控制中心慢性病防治研究所，贵阳550002
3北京市丰台中西医结合医院，北京100072
4贵阳中医学院基础医学院，贵阳550002
[摘要]目的 研究四妙勇安汤含药血清对LPS诱导的小鼠腹腔巨噬细胞Toll样受体4（TLR4）／髓样分化因子88（MyD88）信号通路及TNF-α、IL-6等炎症因子表达的影响，初步探讨其抗动脉粥样硬化的作用机制。方法 采用大、中、小剂量四妙勇安汤水煎剂灌胃干预清洁级SD大鼠，制备含药血清；经MTT法观察含药血清对细胞增殖的影响后，选择各剂量浓度为20%的含药血清干预体外培养的经LPS活化的巨噬细胞，采用ELISA法检测细胞上清液中TNF-α及IL-6含量；荧光定量PCR及Western blot法检测细胞TLR4、MyD88的mRNA及蛋白的表达变化。结果 用LPS刺激细胞后，引起TLR4、MyD88、TNF-α及IL-6的高表达，与正常血清对照组相比，差异具有统计学意义(P <0.01)；而用四妙勇安汤含药血清干预后，能显著抑制各项指标的高表达，与模型组相比，差异具有统计学意义(P <0.05或P <0.01)。结论 四妙勇安汤含药血清能够有效抑制LPS诱导的巨噬细胞炎症反应,其机制可能与调控TLR4/MyD88信号转导通路有关，这可能是该方防治动脉粥样硬化及免疫炎症性疾病作用的机制之一。
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